固相萃取技術是前處理技術的一種,其原理與高效液相色譜相似。*常見的是應用于樣品凈化、樣品的痕量富集、脫鹽、溶劑替換等。
(關于固相萃取小柱常見的使用問題,你可能也想知道!)
在平時與客戶的交流中,發現一些親經常會遇到一些問題。現在我們就針對不同行業的一些常見的問題進行解答。
問
對一個樣品進行前處理,應如何選擇小柱的固定相?
答
根據目標化合物與干擾物的差異,如極性,分子量,pka值等,選擇合適的填料。
確定了小柱的固定相,那應該如何選擇規格?
固相萃取小柱的規格一般使用mg/ml表示,其中mg/ml表示填料重量、填料上方一次所能承載的*大溶液體積。
洗脫體積一般為填料床體積的2-5倍。
吸附容量:硅膠基質填料所能吸附的被測物和干擾物的*大重量,一般不超過填料重量的5%;
聚合物基質填料所能吸附的被測物和干擾物的*大重量,一般不超過填料重量的10-15%。
因此在選擇固相萃取小柱規格時需要先預估吸附的被測物和干擾物重量,再去換算即可知道應選擇什么規格更合適了!
以waters oasis HLB 30cc/60mg的小柱為例,此為聚合物填料小柱,該小柱能吸附被測物和干擾物*大重量=10-15%×60mg=6-9mg。
固相萃取小柱能重復使用嗎?
理論上是可以沖洗干凈重復使用的;
但在實際實驗操作過程中不建議重復使用,因為在沖洗過程中不能保證完全沖洗干凈,其殘留物質在下次使用可能會對被測物造成干擾,導致回收率和重現性差!
同樣固定相規格但不同品牌的固相萃取小柱做同一樣品為什么回收率不一樣?
不同品牌的小柱雖然固定相等規格也一樣,但是其填料的來源,鍵合的技術、裝填的工藝不一樣,這些因素都會導致樣品回收率的差異!
標準上規定某一品牌的固相萃取小柱,可以用同樣規格其他品牌的小柱替代嗎?
理論上都是可以的,
但有些時候測定的基質和物質比較復雜,用標準推薦的固相萃取小柱可能會達到更好的回收率和重現性!
如waters oasis系列的固相萃取小柱在獸殘前處理時候相比于其他品牌的小柱會獲得更好的回收率和重現性!
當然,實驗過程中可能還會遇到更多的問題,以上列舉的只是冰山一角!
小編在這向大家推薦一本寶典——《固相萃取技術與應用》。
這本書詳細介紹了固相萃取原理、方法的建立與優化!對應用中經常遇到的問題提出了解決辦法!
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