轉：跑好薄層板的方法

這樣的資料不少，中國藥典附錄就說的很詳細！不過要真的跑好薄層板還真不是容易的，當然我說的是各個都跑的好的話。

1、薄層板，這個我用過預制板也自己鋪過。薄層板如果是商品板一般比較好，都比較薄，平整，就是載樣量太小，如果碰上點樣量大的，還是自己鋪的好，薄層板比較厚，載樣量大，如果有點10-20ul的，就看出不同來了。
       但是自己鋪的板也有缺點就是如果鋪的厚了，不如商品板靈敏，如果遇到淺顏色的點特別是淺黃-黃顏色上紫外燈的點，我碰到一次商品板陽性而自己鋪的陰性了，就是自己鋪的太厚的緣故。
另外現在因為商品板質量比較好例如墨克的，國內的青島海洋的，我們都用商品板了。如果要薄層掃描，還是買好的板使用。
如果用到NaOH板之類的，用溶劑浸泡一下晾干就行。
另外活化什么的看一下藥典附錄比較權威的哈。

2、點樣 一般藥品標準中都有點樣了的規定有的是限度有的是固定的體積。用毛細管現在很少用的都用，微量進樣器。當然做含量也有自動點樣儀器。我們常用手動點樣，點樣的點按照藥典的要求直徑大小*好了，我看很多化驗人員都是想點的越小越好，我看未必，如果都點于一點，往往點樣量一大，薄層板就載不了了，導致點不成圓形，也影響展開。我看要根據情況定，點的多少和斑點大小成正比。當然也有點成條狀的，另說了。我一般點的直徑也就1mm上下。

另外現在的標準有些做的很不好或者各個企業的產品生產工藝不一樣吧，特別是中成藥往往按照標準操作，提取出來的供試品，用規定的體積1ml2m等一溶解，黏糊糊的，根本沒有辦法點樣，薄層板根本不吸附，這樣我常常按照標準稀釋一倍或2倍，點樣量也隨之倍數增加。這樣供試品溶液稀釋后，有利用點樣。
另外要說的，就是點樣量不是越大越容易出清晰的點，有些點樣量大往往出現拖尾，背景模糊，反而看不清了。我的經驗是往往根據標準 上 下點三個點，放在一起，一起參照看，比較容易判斷準確！
當然薄層掃描的要嚴格按照規定，這個方法一般還行，就是供試品精制除雜做好了，一般展開背景就清晰容易分離。

3、展開劑：這個是*重要的，我常常看到因為展開劑配制不好的，而呈陰性的。展開劑配制要認真，混勻。如果低溫冷藏的要按照規定冷藏。

4、展開方式：我用過立式展開和臥式展開，*好的就是立式展開，展開時溶劑前沿一般平。我常用雙槽立式磨砂玻璃的展開缸。展開劑放入后，先飽和后放入點樣好的薄層板，注意不好讓展開劑泡了點樣點，或距離太近。一般距離點樣點有個2-3mm的距離就比較好。放入薄層板時一定要與展開劑液面平行放入，薄層板兩側也不要碰兩側的展開缸，要不然要出現邊緣效應！
5、噴板：我有時做浸板，因為這樣不嗆人。但*好還是噴板，現在都使用自動噴霧器，噴霧效果好。噴霧一定要均勻，量要足，特別是對做含量掃描的，尤其是。如使用玻璃噴瓶，*好買個皮老虎，噴瓶距離薄層板要遠，只有那樣噴霧霧滴小效果好。
6、顯色。噴霧完成后，一般要顯色，如果顯色裝置當然*好，如果是烘箱一定要把玻璃板；立起來或兩側墊起來，如直接房子鐵板上，玻璃板與之直接接觸恐怕顯色不均勻，尤其要上掃描含量測定的。另外顯色一定要完全，一般以顯色斑點清晰鮮艷。特別是硫酸乙醇顯色的，如果顯色不完全，有些點不出來或不完全，影響含量大小。如果烘過了，背景黑了，顯色斑點也變色，如果上薄層掃描就峰面積小，影響含量了。